Arid
DOI10.27204/d.cnki.glzhu.2020.003301
荒漠植物霸王对高温的生理响应及转录组分析
王改妮
出版年2020
学位类型硕士
学位授予单位兰州大学
中文摘要高温是限制植物生长发育与农业增产的重要非生物胁迫因子。多浆旱生植物霸王(Zygophyllum xanthoxylum)主要分布在我国西北荒漠区,其耐热能力极强。在长期适应高温环境过程中逐渐进化出了自身独特的抗热机制,其体内蕴含着丰富的抗逆基因资源,但目前关于霸王耐热的生理机制和分子基础尚不明确。因此,本研究通过对霸王幼苗进行热处理,以期初步揭示其耐高温的生理机制,并进一步采用RNA-seq高通量测序技术,初步筛选出高温处理下霸王根系和叶片中差异表达的转录因子、热激蛋白、活性氧清除及光合作用相关的基因,以期为揭示霸王适应高温的机理和挖掘关键抗热基因奠定基础。主要取得如下结果:1.对生长18 d的霸王幼苗进行40℃和45℃(6 h·d~(-1))的热处理10 d后,相较于对照(25℃,16 h·d~(-1)),40℃处理下霸王叶片的干鲜重分别增加了24.3%和33.4%、整株相对生长速率增加了57.2%、叶片净光合速率增加了29.3%,而45℃处理下霸王的株高和叶面积显著降低、叶片净光合速率受到显著抑制,表明40℃处理显著促进了霸王的生长、而45℃处理则对其生长产生了抑制作用;与对照相比,40℃和45℃的热处理对霸王叶片质膜透性无显著影响,叶片渗透势随着温度的增加呈下降趋势;此外,45℃处理下霸王叶片中脯氨酸和可溶性糖含量与对照相比分别增加了85.1%和33.3%;相较于对照,40℃和45℃处理后茎中K~+含量分别增加了66.7%和55.6%。2.对18 d的霸王幼苗分别在25℃、40℃和45℃下处理0.5 h和6 h后取其叶片和根进行了转录组测序,共获得166892条Unigene序列,其平均长度为1534bp。共有139130个Unigene在Nr、Nt、Swissprot、KEGG、KOG、Interpro和GO数据库获得了功能注释,占总Unigene数量的83.4%。在此基础上,进一步分析了转录因子、热激蛋白、活性氧清除和光合作用相关的差异表达基因。3.40℃和45℃分别处理0.5 h和6 h均能显著诱导霸王叶片和根中与逆境响应相关的HSF、bHLH、AP2/ERF、bZIP、MYB和WRKY类转录因子编码基因的表达。其中,40℃和45℃处理0.5 h后,转录因子相关编码基因的上调表达数目均显著高于处理6 h。另外,45℃处理0.5 h后叶片中WRKY及AP2/ERF家族、根中的HSF家族编码基因上调数目明显多于40℃处理,表明与40℃处理相比,霸王需上调更多的WRKY、AP2/ERF及HSF家族基因的表达以响应45℃的热胁迫。4.40℃和45℃处理0.5 h时,霸王根和叶片中大量HSP70、HSP90、Small HSP(sHSP)、HSP70-HSP90和ClpB类的热激蛋白编码基因的表达丰度显著上调;处理6 h后,叶片和根中热激蛋白编码基因持续高丰度表达,表明热激蛋白基因在霸王响应高温的整个过程中发挥着关键作用。另外,45℃处理后叶片中HSP70家族、根中sHSP和HSP90家族编码基因上调数目显著多于40℃处理,说明这三类热激蛋白可能在霸王应对45℃热胁迫中发挥重要作用。5.40℃和45℃处理均诱导了霸王根和叶片中活性氧清除相关基因的上调表达,有利于降低ROS对细胞膜的伤害。其中,40℃和45℃处理0.5 h均显著诱导了SOD、GST、Trx、APX和GLR相关编码基因的表达;处理6 h时SOD、Trx、APX、GLR和GST编码基因仍高丰度表达,表明SOD可能同PrxR/Trx、GPX途径以及AsA-GSH循环共同参与40℃和45℃处理下霸王体内活性氧的清除过程。另外,45℃处理0.5 h和6 h后霸王叶片和根中活性氧清除酶编码基因上调总数均高于40℃处理,有助于缓解ROS对植株的伤害。6.40℃处理后霸王叶片净光合速率与气孔导度均显著高于对照,且大量与光系统II、碳固定相关基因表达丰度上调,表明40℃处理提高了叶片气孔导度以增加CO_2供应,并诱导大量光合相关基因上调,二者共同作用提高了叶片的净光合速率;此外,气孔导度的增加亦有降低叶温的效果;而45℃处理后,霸王叶片气孔导度虽高于对照,但净光合速率显著下降,同时大量光合电子传递体亚基和光合碳同化酶编码基因下调表达,表明非气孔因素是45℃热胁迫下限制霸王光合性能的主因。
中文关键词霸王 ; 高温处理 ; 生理响应 ; 转录组 ; 差异表达基因 ; 转录因子 ; 热激蛋白 ; 抗氧化系统 ; 光合作用
语种中文
国家中国
中图法分类号Q945.78
资源类型学位论文
条目标识符http://119.78.100.177/qdio/handle/2XILL650/373071
作者单位兰州大学
推荐引用方式
GB/T 7714
王改妮. 荒漠植物霸王对高温的生理响应及转录组分析[D]. 兰州大学,2020.
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