干旱区生态环境知识资源中心(Arid): 中国野生华东葡萄泛素连接酶VpRH2受bZIP型转录因子调控参与葡萄ABA通路

Arid

	中国野生华东葡萄泛素连接酶VpRH2受bZIP型转录因子调控参与葡萄ABA通路
	王磊; 王丹; 姚文孔; 王跃进
英文摘要	泛素化系统(Ubiquitination-26S proteasome system,UPS)途径在蛋白质降解中发挥着重要的作用。UPS途径在高等植物中高度保守,是一个由E1(泛素激活酶,ubiquitin-activating enzyme)、E2(泛素结合酶,ubiquitin-conjugating enzyme)和E3(泛素连接酶,ubiquitin ligase)顺序调控的,需要ATP参加的级联反应,是多种细胞过程的核心调控机制,而E3泛素连接酶是负责蛋白质泛素化的关键酶,因为其在UPS系统中数量最多而成为泛素级联反应的最复杂的因素。本研究在旱区作物逆境生物学国家重点实验室和农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点开放实验室完成。以中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpRH2在植物生长调节剂处理下的表达模式为基础,通过酵母双杂交筛选获得互作蛋白,拟通过双分子荧光互补试验(Bimolecular fluorescence complementation,BiFC)验证互作;研究VpRH2与互作蛋白在蛋白水平及启动子上的相互关系;将VpRH2稳定整合至拟南芥和欧洲葡萄无核白中,研究过表达拟南芥对外源ABA处理的敏感性变化,以及转基因过表达葡萄中VpRH2在ABA处理后表达趋势的变化。结果表明,中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpRH2在经SA和MeJA处理后表达上调,而在ABA处理后表现出下调的趋势;并且VpRH2启动子在植物生长调节剂处理后表现出了相同的启动活性变化;通过酵母双杂交,筛选到了bZIP2和VpRH2互作,并通过BiFC验证了互作;bZIP2通过UPS途径降解,受ABA处理后上调表达,在酵母细胞中具有转录激活活性,并且主要定位在细胞核中,在细胞其他部位也有少量的分布;bZIP2抑制VpRH2启动子活性,并且这种抑制作用和VpRH2启动子中的ABRE元件和外源ABA处理无关;过表达VpRH2拟南芥增加对外源ABA的耐受性,VpRH2过表达葡萄中bZIP2和野生型相比受ABA处理后表达敏感度下降;bZIP2是STS的正调控子,VpRH2过表达葡萄中STS的表达量明显下调。同时,发现另一个STS的正调控子bZIP1,在蛋白水平不和VpRH2互作,但是能够显著性地抑制VpRH2启动子的活性,这种抑制作用在缺失ABRE元件的VpRH2启动子片段上和外源ABA处理后有所减缓;bZIP1受ABA处理后上调表达,在酵母细胞中具有转录激活活性,并定位在细胞核中。因此,VpRH2抑制植物中bZIP2和STS的表达,bZIP1/2抑制VpRH2的启动子活性,bZIP2和VpRH2互作并通过UPS途径降解;ABA诱导bZIP1/2的表达,抑制VpRH2及其启动子活性。总之,VpRH2受bZIP型转录因子调控并在ABA通路中起重要作用。
英文关键词	中国野葡萄泛素连接酶 bZIP转录因子 ABA处理转录调控
来源出版物	中国园艺学会2017年论文摘要集
出版年	2017
卷号	Vol.44
页码	1
中图法分类号	Q943.2;S663.1
资源类型	会议论文
条目标识符	http://119.78.100.177/qdio/handle/2XILL650/372908
作者单位	西北农林科技大学园艺学院旱区作物逆境生物学重点实验室
推荐引用方式 GB/T 7714	王磊,王丹,姚文孔,等. 中国野生华东葡萄泛素连接酶VpRH2受bZIP型转录因子调控参与葡萄ABA通路[C],2017:1.