干旱区生态环境知识资源中心(Arid): 蒙古沙冬青AmFAD2基因克隆及功能分析

Arid

	蒙古沙冬青AmFAD2基因克隆及功能分析
	张文君; 薛敏; 王茅雁
中文摘要	蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)是我国西北干旱、半干旱荒漠区唯一常绿阔叶灌木,具有极强的抗逆性和防风固沙的作用。脂肪酸去饱和酶(Fatty acid desaturase,FADs)是决定细胞膜脂中不饱和脂肪酸含量的关键因素,在植物响应低温、高温、高盐和干旱等非生物胁迫中起重要作用。本课题组对蒙古沙冬青中Am FAD2的功能进行了初步研究。Am FAD2的开放阅读框长1146 bp,编码382个氨基酸残基,分子量为44.09 KDa,等电点为8.33。在一级结构中含三个酶活性所必须的保守的组氨酸簇(HXXXH; HXXHH; HXXHH)。半定量RT-PCR分析显示,在盐(300 mM NaCl)处理2-48 h的幼苗中,Am FAD2的表达量有较明显的升高;在干旱处理4-14 d的幼苗中,Am FAD2的表达量呈先升高后降低再升高的变化趋势;在对不同器官表达分析中,Am FAD2在果荚中表达量最高,叶和花中有一定量的表达,在根和茎中几乎检测不到。为了验证该基因的功能,成功构建了AmFAD2基因的植物表达载体(p3300-35S-AmFAD2)并通过农杆菌介导法转化拟南芥,获得了超表达Am FAD2的转基因拟南芥纯合体。盐胁迫处理结果显示:将转基因纯合体与野生型种子点种在1/2MS+150 mM NaCl培养基生长7 d后,转基因株系F2-1和F2-5的根长分别为1.28 cm和1.34 cm,野生型为1.06 cm;将转基因和野生型植株幼苗移摘到营养钵中进行300 mM NaCl处理,F2-1和F2-5的存活率(分别是62.5%、75%)显著高于野生型(56.25%),F2-1和F2-5的相对电导率(分别为44.36%和49.01%)显著低于野生型(62.24%)。研究表明,Am FAD2基因提高了转基因拟南芥对盐胁迫的耐受性,为进一步研究Am FAD2基因在抗逆中的功能提供依据。
中文关键词	沙冬青 ; AmFAD2 ; 纯合体 ; 基因克隆 ; 功能分析
来源出版物	2018中国遗传学会第十次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编
出版年	2018
页码	1
中图法分类号	S793.9
资源类型	会议论文
条目标识符	http://119.78.100.177/qdio/handle/2XILL650/337224
作者单位	内蒙古农业大学生命科学学院
推荐引用方式 GB/T 7714	张文君,薛敏,王茅雁. 蒙古沙冬青AmFAD2基因克隆及功能分析[C],2018:1.