干旱区生态环境知识资源中心(Arid): 塔里木盆地荒漠区柽柳属植物总DNA提取及RAPD体系优化

Arid

	塔里木盆地荒漠区柽柳属植物总DNA提取及RAPD体系优化
其他题名	Total DNA Extraction and RAPD System Optimization of Tamarix Plants in Tarim Basin Desert
	庞新安 1; 白宝伟 2; 姜喜 3; 陈加利 3; 焦培培 1
来源期刊	基因组学与应用生物学
ISSN	1674-568X
出版年	2015
卷号	34 期号:9 页码:2015-2023
中文摘要	本研究以干旱荒漠盐生植物柽柳的幼嫩叶片为实验材料,探究摸索其总DNA的提取方法与RAPD-PCR的反应体系及扩增条件。结果表明,改良CTAB-高盐沉淀法较好地提取出了柽柳植物的总DNA,其产量、质量均有明显提高,比较适合于多数柽柳属植物的DNA提取;同时,通过单因素试验比较优化筛选出了适合于柽柳植物RAPD分析的最佳的PCR反应体系与扩增条件,其25 muL的反应体系中包含有Mg~(2+)=2.5 mmol/L、dNTPs=0.25 mmol/L、引物=0.30 mumol/L、Taq DNA聚合酶=1.5 U、模板DNA=200 ng;其最适扩增条件为95℃预变性4 min,94℃变性30 s、36℃退火40 s、72℃延伸1 min、40个循环;最终在72℃下延伸10 min,4℃下保存;另外,通过6条多态性引物的扩增效果证实该优化体系比较稳定,扩增条件比较合适,能够满足多数柽柳植物分子多态性的检测要求。
英文摘要	In this research, the extraction method for total DNA from young leaves of Tamarix plants growing in arid, desert, saline-alkali habitat was expored and optimized their reaction system and amplification conditions of RAPD-PCR. The results showed that the total DNA extracted had good quality by using the improved method based on CTAB-high salt precipitation and its yield were also high significantly, so the method could be fit for the total DNA extraction of most plants in Tamarix L.. At the same time, by one-factor comparative experiments, the suitable RAPD-PCR system for Tamarix plants was developed as follows: in 25 muL PCR solution, including 2.5 mmol/L Mg~(2+), 0.25 mmol/L dNTPs, 0.30 mumol/L primer, 1.5 U Taq DNA polymerase, 200 ng DNA template. Moreover, the amplification conditions were 95℃ for 4 min, 40 cycles of 94℃ for 30 s, 36℃ for 40 s, and 72℃ for 1 min and a terminal extension step at 72℃for 10 min, and then kept at 4℃. In addition, through the confirmatory test with six polymorphic primer pairs, the optimized reaction system could amplify stably and its amplification conditions can meet the requirement for molecular polymorphic analysis of most Tamarix L. plants.
中文关键词	塔里木盆地 ; 柽柳属 ; DNA提取 ; RAPD体系优化
英文关键词	Tarim basin Tamarix L. DNA extraction RAPD Optimization
语种	中文
国家	中国
收录类别	CSCD
WOS类目	PLANT SCIENCES
WOS研究方向	Plant Sciences
CSCD记录号	CSCD:5571405
资源类型	期刊论文
条目标识符	http://119.78.100.177/qdio/handle/2XILL650/232939
作者单位	1.新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地, 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地, 阿拉尔, 新疆 843300, 中国; 2.塔里木大学生命科学学院, 阿拉尔, 新疆 843300, 中国; 3.塔里木大学植物科学学院, 阿拉尔, 新疆 843300, 中国
推荐引用方式 GB/T 7714	庞新安,白宝伟,姜喜,等. 塔里木盆地荒漠区柽柳属植物总DNA提取及RAPD体系优化[J],2015,34(9):2015-2023.
APA	庞新安,白宝伟,姜喜,陈加利,&焦培培.(2015).塔里木盆地荒漠区柽柳属植物总DNA提取及RAPD体系优化.基因组学与应用生物学,34(9),2015-2023.
MLA	庞新安,et al."塔里木盆地荒漠区柽柳属植物总DNA提取及RAPD体系优化".基因组学与应用生物学 34.9(2015):2015-2023.