干旱区生态环境知识资源中心(Arid): 干旱胁迫条件下发菜Ferritin差异表达与基因克隆

Arid

	干旱胁迫条件下发菜Ferritin差异表达与基因克隆
其他题名	Differential Expression and Gene Cloning of Ferritin from Nostoc flagelliformeSubjected to Desiccation
	梁文裕 1; 焦广飞 2; 周有文 1; 张亚萍 1; 陈伟 2
来源期刊	植物科学学报
ISSN	2095-0837
出版年	2012
卷号	30 期号:1 页码:72-78
中文摘要	发菜(Nostoc flagelliforme)是一种陆生固氮蓝藻,具有强烈的旱生生态适应性。运用双向电泳技术、凝胶图像分析、MALDI-TOF-TOF/MS质谱鉴定和数据库检索,发现发菜Ferritin在干旱胁迫条件下表达量逐渐降低。根据鉴定的Ferritin已知氨基酸序列设计简并性引物克隆该基因,获得了长度为540 bp的DNA,GenBank登陆号为HM854287。序列比较显示该基因具有较高的保守性,蛋白质二级结构主要由alpha螺旋和随机卷曲构成。RT-PCR分析表明,Ferritin mRNA在干旱胁迫条件下表达量逐渐降低,与Ferritin的表达趋势一致。将Ferritin基因在大肠杆菌中表达,获得符合预期的外源重组蛋白(22.4 kD)。实验结果可为进一步研究发菜耐旱的分子机理及探讨发菜对极端干旱环境的适应和保护机制奠定基础。
英文摘要	Nostoc flagelliforme is a terrestrial nitrogen-fixing cyanobacterium with strong drought adaptability.We performed 2-DE analysis,gel image analysis and MALDI-TOF-TOF/MS to compare and identify differential proteins from N.flagelliforme subjected to desiccation.The results indicated that Ferritin,Dps family protein expression quantum gradually declined under desiccation stress.The Ferritin gene was cloned by designed degeneracy primer based on identified amino acid sequences.A full length of 540 bp DNA was obtained(GenBank access number: HM854287).Homology analysis showed that the N.flagelliforme Ferritin gene had high consensus regions.The secondary structures of Ferritin were made up of alpha helix and random coil.The RT-PCR showed that mRNA of Ferritin gradually declined under drought stress.The Ferritin gene was expressed in Escherichia coli,and a 22.4 kD heterologous protein was observed.The results laid a foundation for understanding the drought-resistant molecular mechanisms and protection mechanisms of N.flagelliforme in extreme arid environments.
中文关键词	发菜 ; 差异表达 ; 基因克隆 ; 原核表达
英文关键词	Ferritin RT-PCR Nostoc flagelliforme Ferritin Differential expression Gene cloning RT-PCR Prokaryotic expression
语种	中文
国家	中国
收录类别	CSCD
WOS类目	GENETICS HEREDITY
WOS研究方向	Genetics & Heredity
CSCD记录号	CSCD:4492308
来源机构	宁夏大学
资源类型	期刊论文
条目标识符	http://119.78.100.177/qdio/handle/2XILL650/228858
作者单位	1.宁夏大学生命科学学院, 银川, 宁夏 750021, 中国; 2.福建农林大学生命科学学院, 福州, 福建 350002, 中国
推荐引用方式 GB/T 7714	梁文裕,焦广飞,周有文,等. 干旱胁迫条件下发菜Ferritin差异表达与基因克隆[J]. 宁夏大学,2012,30(1):72-78.
APA	梁文裕,焦广飞,周有文,张亚萍,&陈伟.(2012).干旱胁迫条件下发菜Ferritin差异表达与基因克隆.植物科学学报,30(1),72-78.
MLA	梁文裕,et al."干旱胁迫条件下发菜Ferritin差异表达与基因克隆".植物科学学报 30.1(2012):72-78.